Измерение - флуоресценция
Cтраница 2
Методы измерения флуоресценции применимы к флуоресцирующим веществам и соединениям, из которых путем соответствующих превращений можно получить их флуоресцирующие производные. Поскольку интенсивность флуоресценции зоны не зависит от ее формы, то предварительно строят калибровочный график зависимости количества вещества от интенсивности флуоресценции. Промышленность выпускает специальные устройства для проведения подобных измерений. [16]
Из измерений флуоресценции невозможно определить значения kn и kg в отдельности, и для того, чтобы получить значение kg, нужно использовать как время жизни TO, найденное описанными выше методами, так и эффективность образования триплетов ( ft, измеренную независимым методом. [17]
Для измерений флуоресценции исследуемого вещества на пластинке применяют специальные лриборы - флуорометры. В последнее время начинают использовать аппараты, сочетающие флуорометрический метод определения с техникой денситометрии, - флуороденси-тометры, обеспечивающие непосредственную флуоромет-рическую оценку результатов хроматографии в тонких слоях. [18]
При измерении флуоресценции очень разбавленных растворов существенный вклад в общее измеряемое испускание вносит флуоресценция кюветы и растворителя. Всегда следует проверять флуоресценцию чистого растворителя при тех же условиях, в которых измеряется и флуоресценция самого раствора. Если она значительна, получаемый спектр следует вычитать из спектра раствора до его исправления. Для веществ, имеющих относительно долго-живущую флуоресценцию, существенное значение может иметь тушение растворенным кислородом. Кислород обычно удаляют пропусканием через раствор тока азота или вакуумированием. [19]
Почему для измерения флуоресценции используют только разбавленные растворы концентрацией 10 3 - Ifr4 моль / л и менее. [20]
Вначале производят измерение флуоресценции в стандартном растворе и в контрольном опыте к нему, а затем в испытуемых растворах и в контрольном опыте к ним. [21]
 |
Схема фотометрического титратора. [22] |
Приборы для измерения флуоресценции известны под названием флуорометров или флуофотометров. Они аналогичны нефелометрам в том отношении, что освещение производится под прямым углом к направлению наблюдения. На практике каждый из этих приборов можно применять как флуорометры и как нефлометры при условии, что лампа может создавать как ультрафиолетовое, так и видимое излучение. [23]
При проведении измерений флуоресценции методом импульсного фотолиза необходимо следить за тем, чтобы при перекрывании спектрального источника света не изменялось отражение света флуоресценции, что может привести к ошибкам. [24]
При проведении измерений флуоресценции методом импульсного фотолиза необходимо следить за тем, чтобы при перекрывании спектрального источника света не изменялось отражение света флуоресценции, что может привести к ошибкам. [25]
 |
Кривые, показывающие эффект наслаивания Основного си -. i j него 82 в смеси воды с ДМА ( 20. 80. [26] |
Трудности в измерении флуоресценции [60] в сочетании со многими факторами, влияющими на нее как в растворе, так и в субстрате [61,62], уменьшают вероятность хорошей корреляции между колористическими свойствами раствора и свойствами конечных продуктов. [27]
Источники ошибок при измерении флуоресценции еще более многочисленны, чем при измерении поглощения. Свет флуоресценции, который должен быть измерен, необходимо с помощью фильтров отделить от выходящего из клетки рассеянного возбуждающего света ( часть этого света может иметь ту же или почти ту же длину волны; см. фиг. Еще одним источником ошибок является реабсорбция излучаемого света внутри самой клетки; ее, однако, можно свести к минимуму, если использовать ткани с. В нормальном листе реабсорбция вблизи максимума поглощения хлорофилла а значительно уменьшает интенсивность флуоресценции и еще больше сдвигает максимум в длинноволновую сторону. В то же время дальний красный максимум флуоресценции при 740 нм, где хлорофилл поглощает совсем слабо, в нормальном листе оказывается значительно выше благодаря более высокому содержанию хлорофилла. [28]
Наибольшее распространение при измерении интегральной флуоресценции имеют фотоумножители с торцевым сурьмяно-цезиевым фотокатодом диаметром 34 мм - ФЭУ-19 и ФЭУ-29; они одинаковы по изготовлению, но ФЭУ-29 - лучший образец. Для - измерения свечения таких растворов, как экстракты родаминовых комплексов металлов, целесообразно применять фотоумножители с вис-муто-серебряно-цезиевыми или сурьмяно-натриево-калиево-це - зиевыми фотокатодами, например ФЭУ-12, ФЭУ-14, ФЭУ-38. Выше было отмечено, что такие фотоумножители особенно эффективны во флуориметрах с возбуждением при помощи ламп накаливания; их следует применять также и для снятия спектров флуоресценции. Применение остальных типов ФЭУ во флуориметрии пока ограниченно, но они могут быть полезными для разрешения отдельных частных задач. [29]
Определение основано на измерении ярко-голубой флуоресценции комплексного соединения бора с бензоином в щелочной водно-спиртовой среде. Спектр возбуждения этого комплекса характеризуется максимумом при 370 нм, спектр флуоресценции - максимумом при 450 нм. В области 450 - 460 нм интенсивность флуоресценции пропорциональна содержанию бора в интервале 0 8 - 50 мкг бора на 10 мл раствора. Флуоресценция устойчива в течение 5 - 15 мин после добавления бензоина. Определению бора мешают АР, Fe3, Мп2, Сг3, которые следует удалять. [30]
Страницы: 1 2 3 4 5