Cтраница 1
Оксидазная активность свойственна ферментам млекопитающих, тогда как аналогичные ферменты из тканей пищи, грибов и микроорганизмов являются дегидрогеназами, использующими в качестве физиологических акцепторов электронов NAD или другие переносчики электронов. Ферменты млекопитающих претерпевают превращение в оксидазу из дегидрогена-зы в процессе выделения [ Rajagopalan К. [1]
Реактив для определения оксидазной активности обладает бактерицидными свойствами, поэтому мембранные фильтры после проявления реакции следует сразу же переносить обратно на среду и пересевать колонии не позднее 5 - 10 мин от начала контакта с реактивом. Темно-красный цвет лакто-зоположительных колоний на среде Эндо препятствует проявлению сине-фиолетовой окраски. В сомнительных случаях следует повторить определение оксидазного теста у этих же штаммов бактерий, выращенных на агаре. [2]
Таким образом, отдельные составные части белков способны повышать оксидазную активность меди. Все аминные комплексы иона железа неустойчивы в водных растворах. Кислородсодержащие комплексы, а именно салицилаты железа, обнаруживают резко выраженный эффект угнетения каталазной функции при введении в координационную сферу возрастающего числа кислородных атомов. Неактивны и в каталазном и в оксидаз-ном процессе и комплексы железа с таннином, куркумином и рядом других кислородсодержащих соединений. Активатором оксидазной функции является ядро антипирина, сходство которого с порфириновыми соединениями очевидно. [3]
Эндо, снимают петлей и штрихом наносят на смоченную реактивом для определения оксидазной активности бактерий фильтровальную бумагу. [4]
Для учета выбирают фильтры, на которых выросли изолированные колонии, и определяют их оксидазную активность. Все колонии, которые приобрели сине-фиолетовую окраску, из учета исключают. Среди колоний, не изменивших первоначального цвета, подсчитывают число темно-красных с металлическим блеском и без блеска, а также слизистых, крупных, выпуклых лактозоположительных колоний с отпечатком на обратной стороне фильтра. Дальнейшего подтверждения принадлежности таких колоний с характерной морфологией, окраской и отрицательным оксидазным тестом к лактозоположительным кишечным палочкам не требуется. [5]
Спустя еще 1 мин в кювету добавляют цитохром с в конечной концентрации 100 мкг / мл и регистрируют оксидазную активность до полного исчерпания кислорода в среде. [6]
Осуществление санитарно-бактериологического анализа требует наличия стерильной воды, сред, реактивов для окраски по Граму, реактива для определения оксидазной активности бактерий. [7]
При экстракции ткани фосфатным буфером происходит вымы-ьание не только ферментов цикла Кребса, но и цитохрома с, так что высокие оксидазные активности препаратов могут быть получены только при добавлении цитохрома с в среду инкубации. [8]
Мембранный фильтр с выросшими на нем колониями бактерий переносят пинцетом на кружок фильтровальной бумаги большего диаметра, смоченный реактивом для определения оксидазной активности бактерий. Результат определяют через 2 - 4 мин. Колонии с синим ободком или посиневшие не учитывают. [9]
В качестве экспрессного теста для быстрого, за 1 - 5 мин, отделения псевдомонад, аэромонад, вибрионов от бактерий семейства Enterobacteriaceae рекомендовано определение оксидазной активности бактерий. Такой же экспрессный тест определения каталазной активности применяют при исследовании на наличие энтерококков. Тест позволяет в течение минуты отделить энтерококки от прочих грамположительных кокков, которые обладают активной каталазой. [10]
В качестве экспрессного теста для быстрого, за 1 - 5 мин, отделения псевдомонад, аэромопад, вибрионов от бактерий семейства Enterobacteriaceae рекомендовано определение оксидазной активности бактерий. Такой же экспрессный тест определения каталазной активности применяют при исследовании на наличие энтерококков. Тест позволяет в течение минуты отделить энтерококки от прочих грамположительных кокков, которые обладают активной каталазой. [11]
Нами [31] было показано, что комплексы меди, кобальта и никеля с основаниями Шиффа, полученными из салицилового альдегида и о-ами-нофенола ( САФ), проявляют заметную оксидазную активность. Были изучены водно-пиридиновые растворы комплексов кобальта, меди, никеля, цинка, кадмия, свинца и железа. Обращает на себя внимание высокая активность комплекса, содержащего медь, которая, как известно, является специфическим катализатором окисления аскорбиновой кислоты. На втором месте оказывается железо и на третьем - кадмий и кобальт. Этот факт указывает на возможность активации оксидазной функции, у таких мало активных ионов с постоянной валентностью, как кадмий. [12]
Артемова предложила выращивать посевы на мембранных фильтрах на стандартном питательном - агаре, что исключает угнетающее влияние ТТХ, а для облегчения подсчета выросших колоний использовать реактив для определения оксидазной активности. [13]
При отношении БСИ: белок до 3 3: 1 Мет 65 и Трп 59 окисляются. Одновременно происходит более медленное падение оксидазной активности цитохро-ма с. Если отношение БСИ: белок более 5: 1, происходит модификация второго ( не идентифицированного) Тир и окисление Мет 80, что приводит к потере оксидазной активности. [14]
Оксидазный тест, если необходимо, выполняют путем нанесения части колонии на фильтровальную бумагу, смоченную реактивом. Более наглядно и быстро можно определять оксидазную активность, накапывая реактив на всю поверхность чашки или на отдельный сектор. [15]