Хроматин

Cтраница 3

Помимо выделения хроматина из изолированных ядер, существуют методы выделения хроматина непосредственно из растительных тканей. При такой обработке разрушаются не только клеточные стенки, но и ядерные мембраны и происходит освобождение субъядерных компонентов. При такой обработке сильно повреждаются также ядрышки. Полученный осадок содержит крахмальные зерна, на которые наслоены хроматин и фрагменты ядер. Хлоропласты и фрагменты хлоропластов, если они присутствовали в исходной ткани, также обнаруживаются в этом осадке. Студенистый слой отделяют от нижележащего крахмального слоя, ресуспендируют в среде для растирания и вновь центрифугируют несколько раз для удаления крахмала. Нехромосомный материал удаляется главным образом на этой последней стадии, которая может быть повторена. Непосредственное выделение хроматина из тканей не требует большой затраты времени и позволяет получить до 95 % присутствовавшего в исходной ткани хроматина, причем степень чистоты препарата в данном случае такая же, какая достигается и при выделении хроматина из изолированных ядер. [31]

Подобное состояние хроматина возникает в ядрах дифференцированных клеток и под влиянием высоких доз кинетина и гиббереллина. [32]

Доменная организация хроматина, как уже говорилось, проявляется на уровне метафазных хромосом. Остов-сохраняет общую форму метафазнои хромосомы и состоит главным образом из полипептидов двух типов. [33]

Если к хроматину, обладавшему РНК-полимеразной активностью, добавляли абсцизовую кислоту ( 10 - 6 М), то это приводило к торможению полимеразной активности на 22 - 38 % в том случае, когда этот ингибитор вводили в систему гомогенизированных проростков. Эти данные Пирсон и Вэринг интерпретируют как возможность абсцизовой кислоты влиять на РНК-полимеразную активность только после связывания этого ингибитора с эндогенным цитоплазмати-ческим фактором. [34]

Морфологически в хроматине различают диспергированную часть - эухроматин и компактную - гетерохроматин. [35]

При обработке нуклеазами хроматин быстро расщепляется на фрагменты, состоящие из 205 15 пар оснований, и более медленно - на фрагменты, состоящие из 170 пар оснований. Этот результат в сочетании с приведенными выше данными позволил предположить существование структуры, в которой фрагмент ДНК, состоящий из 200 пар оснований, обмотан вокруг гистонового октамера таким образом, что-двухцепочечная нить ДНК длиной 68 нм упаковывается в одной - у-ча-стице размером порядка 10 нм. Соседние v-частицы связаны друг с другом очень короткими участками ДНК. Согласно-другим данным [ 296а ], на каждую v-частицу приходится один отрицательный виток суперопирали. [36]

Схематическое строение рибосом Е. coli ( м - число иуклеотидных остатков в молекуле РНК. [37]

В клеточном ядре хроматин уложен очень плотно. Наивысшая степень компактизации хроматина наблюдается в хромосомах на стадии митоза. [38]

Как известно, хроматин представляет собой субстанцию хромосом интерфазного ядра. [39]

Ядра вздуваются, хроматин собирается в неправильно разветвленные образования и позднее возникают его очень характерные сетчатые структуры. Вначале такие структуры плотные, в дальнейшем они все больше расширяются и заполняют все пространство клетки. Вирусные палочки появляются в еще неразрушенном, закрытом ядре в течение первых 4 дней. Вначале они оголенные, размером 41X257 ммк, свободно расположены в плазме ядра или же лежат на стенках ячеек стромы. Вокруг отдельно расположенных вирусных палочек формируется белковая капсула, которая образуется за счет изменения шарообразных частичек, составляющих строму, или же только в связи с их перемещением. [40]

Показано, что хроматин лимфоцитов селезенки и вилочковой железы характеризуется меньшим содержанием негистоновых белков по сравнению с хроматином клеток радиорезистентных органов [ Su-ciu D. [41]

Важный вопрос организации хроматина касается судьбы нуклео-сом при транскрипции. Электронная микроскопия интенсивно транскрибирующихся участков хроматина, например рибосомных генов, ясно показывает, что нуклеосом на них нет даже в тех случаях, когда между молекулами РНК-полимеразы, движущимися одна за другой по гену, виден промежуток. Необходимо отметить, что регуляция активности рибосомных генов осуществляется в клетке путем изменения числа работающих генсв, но не интенсивности транскрипции. [42]

Влияние степени конденсации хроматина на транскрипцию ярко проявляется в так называемом эффекте положения. Эффект положения открыт и лучше всего изучен у дрозофилы. В хроматине дрозофилы имеются участки сильно конденсированного хроматина, который не транскрибируется - так называемого гетерохрома-лшна. [43]

Следующий уровень организации хроматина характеризуется дальнейшим увеличением суперспирализации ДНК и образованием соленоидоподобных фибрилл диаметром 20 - 30 нм. Возможно, эти соленоиды обладают нерегулярной структурой, что находит отражение в так называемой нуклеомерной организации фибриллы диаметром 20 - 30 им, наблюдаемой в электронном микроскопе. [44]

Какому уровню организации хроматина может соответствовать конфигурация ДНК в составе нуклеоидов. Очевидно, в данном случае можно говорить лишь об условном соответствии, поскольку в процессе лизиса клеток структура хроматина не сохраняется. Сле-дует также учитывать, что нуклеоиды не содержат гистонов и таким образом не сохраняется даже нуклеосомный уровень организации хроматина. Однако факт, что ДНК в продукте лизиса клеток сохраняет суперспиральную конфигурацию, допускает формальный расчет основных ее параметров, которые после введения необходимых поправок можно сравнивать с соответствующими параметрами, характерными для нуклеосомного уровня организации. Такой расчет для вычисления плотности суперспирализации ДНК клеток китайского хомячка показывает, что благодаря переходу от низкой ионной силы и физиологической температуры к фактическим условиям лизиса а увеличивается на - 0 02 [ Hartwig M. Такая же величина 0 ( 0 076) получена для суперспиральной ДНК клеток дрозофилы с учетом аналогичных поправок [ Benyajati Ch. [45]

Страницы: 1 2 3 4