Cтраница 2
Затем микропланшеты интенсивно ( не менее 3 раз) отмывают фосфатным буфером, содержащим 0 05 % твина-20. Блокирование неспецифических мест связывания проводят 1 % - ным раствором БСА по 100 мкл в лунку и инкубируют в течение 1 ч при 37 С. БСА интенсивно отмывают фосфатным буфером с твином-20 и в лунки вносят по 50 мкл культуральной жидкости. Микропланшеты инкубируют одним из выше перечисленных способов, затем тщательно отмывают и вносят по 50 мкл конъюгата кроличьих антител. После инкубации в течение часа при 37 С несвязавшиеся кроличьи антитела отмывают и вносят субстрат АБТС. В качестве положительного контроля используют сыворотку мышей, которые были иммунизированы данным антигеном и селезенки которых использовали для сливания. [16]