Гомологичная рекомбинация
Cтраница 3
Мы видим, что по крайней мере у бактерий в общих чертах понятен механизм центрального события гомологичной рекомбинации поиска гомологии и образования полу хиазмы. [31]
 |
Схема гомологичной рекомбинации ДНК. [32] |
Среди различных перестроек, претерпеваемых молекулами ДНК в составе живых организмов, особенно важной и повсеместно распространенной является гомологичная рекомбинация. Суть этого процесса состоит в том, что две идентичные или близкие по своей первичной структуре двунитевые ДНК объединяются в единую четырехнитевую структуру, в которой оказываются сближенными достаточно протяженные идентичные участки обеих исходных структур, и эти структуры обмениваются своими фрагментами. [33]
Кроме систем рекомбинации, выполняющих общие функции, например рекомбинацию в мейозе у эукариот или рекомбинационную репарацию у всех организмов, существуют специализированные системы гомологичной рекомбинации, выполняющие ту или иную частную задачу. [34]
В настоящее время известны по меньшей мере три разных механизма рекомбинации попавшей в бактериальную клетку чужеродной ДНК с бактериальной хромосомой ( или с плазмидой) in vivo: 1) общая гомологичная рекомбинация, 2) сайт-специфическая рекомбинация и 3) негомологичная рекомбинация. [35]
В этом случае поступившая извне ДНК рекомбинируется с клеточной ДНК путем реципрокного обмена соответствующими участками. Гомологичная рекомбинация находится под контролем гена гее А; мутанты с дефектом этого гена ( rec -) не способны к гомологичной рекомбинации. [36]
Системы репликации и репарации ДНК хоть и очень редко, но все же ошибаются. Другой источник неспаренных нуклеотидов - гомологичная рекомбинация, в ходе которой образуются гетеродуплексы, состоящие из двух комплементарных цепей, исходно принадлежавших разным молекулам ДНК ( см. гл. Такие нарушения структуры ДНК репари-руются, по крайней мере у бактерий и низших эукариот. [37]
На основании полного восстановления активности му-тантных генов при вырезании IS-элементов и транспозонов предполагают, что вырезание происходит абсолютно точно и что дуплици-рованный участок ДНК-мишени снова оказывается представленным одной копией. В принципе, такой результат может быть достигнут за счет гомологичной рекомбинации между окружающими транспо-зон дуплицированными последовательностями или за счет ошибки репликации, вызванной наличием на концах транспозонов инвертированных повторов. [38]
Поскольку дефектные по тимидинкиназе ВКО спонтанно возникают с относительно высокой частотой ( примерно 1 на 103 - 104 вирусных частиц), нередко проводят котрансфекцию клеток каким-либо селективным маркером и нужным геном. Это облегчает разграничение спонтанных мутантов и мутантов, полученных с помощью гомологичной рекомбинации. В качестве селективного маркера обычно используют ген пео, кодирующий фермент неомицин-фос-фотрансферазу II и обеспечивающий устойчивость к аналогу канамицина G-418. Этот ген, в отличие от других селективных маркеров, остается стабильным при встраивании в геном ВКО. [40]
Изучая мРНК, транскрибируемые с интактных и модифицированных Т - ДНК, Шелл и др. показали, что гены, ответственные за развитие корончатого галла, локализованы в Т - ДНК. Это означало, что можно удалить из Т - ДНК эти гены и ввести ее с помощью гомологичной рекомбинации в Ti-плазмиду, а последнюю - в растительные клетки. [41]
В этом случае поступившая извне ДНК рекомбинируется с клеточной ДНК путем реципрокного обмена соответствующими участками. Гомологичная рекомбинация находится под контролем гена гее А; мутанты с дефектом этого гена ( rec -) не способны к гомологичной рекомбинации. [42]
Сайт-спещфическая рекомбинация всегда играет ту или иную вполне кснкретную частную роль. Гомологичная рекомбинация тоже имеет втлне конкретные непосредственные функции, например обеспе-чеще пострепликативной репарации или осуществление спарива-ни. Но кроме этих непосредственных функций рекомби-нагия играет очень важную роль в эволюции живой природы. [43]
Сайт-специфическая рекомбинация всегда играет ту или иную вполне коркретную частную роль. Гомологичная рекомбинация тоже имеет вшлне конкретные непосредственные функции, например обеспе-пострепликативной репарации или осуществление спарива-гомологов, необходимого для правильного расхождения хро-моом в мейозе. [44]
Сайт-специфическая рекомбинация всегда играет ту или иную вполне конкретную частную роль. Гомологичная рекомбинация тоже имеет впсще конкретные непосредственные функции, например обеспе-чеще пострепликативной репарации или осуществление спарива-нш гомологов, необходимого для правильного расхождения хро-моом в мейозе. Но кроме этих непосредственных функций рекомби-нагия играет очень важную роль в эволюции живой природы. [45]
Страницы: 1 2 3 4