Измерение - фосфоресценция
Cтраница 2
Люминесцентное определение органических соединений основано главным образом на: а) прямых методах анализа по флуоресценции или фосфоресценции, с использованием различий в условиях возбуждения излучения и излучения определяемого соединения и сопутствующих компонентов; б) эффекте Шпольского; в) измерении фосфоресценции при комнатной температуре. Два последних способа мы рассмотрим подробно. [16]
Люминесцентное определение органических соединений основано [7] главным образом на: а) прямых методах анализа по флуоресценции или фосфоресценции с использованием различий в условиях возбуждения излучения и излучения определяемого соединения и сопутствующих компонентов; б) эффекте Шпольского; в) измерении фосфоресценции при комнатной температуре. [17]
Его флуоресценцию можно успешно использовать в качестве стандарта и для измерений фосфоресценции, если применять устройство с двумя синхронными прерывателями ( см. раздел III, H, 1), позволяющими легко переходить от одного режима к другому. Это соединение фосфоресцирует в инфракрасной области и, следовательно, не мешает измерению фосфоресценции других соединений. [18]
Вайнфорднер и Лац [356] определили аспирин в 0 4 мл сыворотки или плазмы крови экстракцией хлороформом, упариванием, измерением фосфоресценции при 77 К в смеси эфир - пентан - этанол ( 5: 5: 2) с использованием для возбуждения белого света ксеноновои дуги и измерением фосфоресценции при 410 нм. [19]
Комплектные спектрофлуориметры с двумя монохромато-рами, из которых один служит для возбуждения флуоресценции лучистым потоком переменной длины волны, а второй - для спектрального разложения излучения флуоресценции, выпускают некоторые фирмы США. Таковы Аминко-Боумен спект-рофотофлуорометр ( Америкен Инструменте Компани), диф-фракционный прибор с ксеноновой лампой, снабженный приставками для термостатирования испытуемых растворов и твердых веществ, для работы в инфракрасной области и для измерения фосфоресценции в отраженном свете при низких температурах ( до - 114 С); флуоресцентный спектрофотометр Флуо-риспек типа СФ-1 ( Байрд Этомик Инкорпорейшн) с двойными диффракционными монохроматорами; спектрофлуорометр ( Фэр-ренд Оптикел Компани) с ксеноновым осветителем и регистрирующей приставкой, позволяющий производить измерения в объемах жидкости от 0 2 до 10 мл. К обычным спектрофотометрам большинство зарубежных фирм ( в частности Бекман, Перкин-Эльмер, США; Карл Цейсе, ФРГ) выпускает специальные приставки для проведения флуоресцентных измерений. [20]
Вайнфорднер и Лац [356] определили аспирин в 0 4 мл сыворотки или плазмы крови экстракцией хлороформом, упариванием, измерением фосфоресценции при 77 К в смеси эфир - пентан - этанол ( 5: 5: 2) с использованием для возбуждения белого света ксеноновои дуги и измерением фосфоресценции при 410 нм. [21]
Гораздо проще обстоит дело с рамановским испусканием в твердых стеклообразных растворах при 77 К. К тому же, поскольку раманов-ское испускание ( точнее следовало бы сказать рамановское рассеяние -) происходит в пределах времени колебания световой волны, оно полностью убирается фосфороскопом и, следовательно, не мешает измерению фосфоресценции или замедленной флуоресценции ни в жидких, ни в твердых средах. [23]
На рис. 170 показан пример практического применения селективной сенсибилизации. Он относится к обнаружению 0 01 % антрацена в образце пирена, содержащем, кроме того, 0 01 % 1 2-бензантрацена. Использование для анализа этой системы обычной спектрофлуориметрии затруднено, так как спектры поглощения и испускания всех трех соединений перекрываются. Измерение фосфоресценции нецелесообразно, поскольку фосфоресценция антрацена очень слаба. [24]
 |
Фосфоресцирующие примеси в бенз - ( а-пирене. [25] |
Это соединение поглощает при всех длинах волн короче 405 нм и испускает интенсивную флуоресценцию в области 400 - 500 нм. Таким образом, по флуоресценции в нем можно обнаружить только те примеси, которые поглощают при длинах волн больше 405 нм или испускают при длинах волн меньше 400 нм. Фосфоресценция бенз - ( а) - пирена ( SP-полосы на рис. 163 и 164) испускается в крайгой и близкой инфракрасной областях, и, следовательно, вся спектральная область до 680 нм свободна для наблюдения фосфоресценции примесей. Поэтому в данном случае измерения фосфоресценции очень эффективны. [26]
Спектр фосфоресценции примыкает к спектру S - Г - поглощенпя со стороны длинных волн. Частота 0 - 0-полосы фосфоресценции определяется разностью энергий уровней SQ и Т, поэтому съемка спектров фосфоресценции является удобным методом определения триплетной энергии молекул. Фосфоресценция и замедленная термофлуоресценция конкурируют между собой, причем при низких температурах преобладает или даже исключительно происходит первая. Оба процесса требуют значительной заселенности запрещенного триплетного состояния, что возможно за счет интенсивной интеркомбинационной конверсии с уровня S. Измерения фосфоресценции позволяют количественно наблюдать за ходом фотохимических реакций, в которых исходными являются триплетные состояния молекул. [27]
Свет от ртутной лампы среднего давления АН4 ( А) фокусируется с помощью конденсора / на небольшом отверстии Д и с помощью коллиматора направляется в виде параллельного пучка. Ось поляризации должна быть параллельна поверхности образца. Флуоресцентное свечение образца фокусируется на детекторе - кремниевом фотоэлементе - Я2 с помощью линзы УЗ и подходящего фильтра Жз, поглощающего любое возбуждающее излучение. Для измерения фосфоресценции соотношение фаз секторов BI и В % должно быть таким, чтобы проходило только фосфоресцирующее излучение. [28]
При измерениях под прямым углом цилиндрические стенки кюветы закрывают отрезком черной полиэтиленовой трубки с прямоугольным отверстием размером 1 X 1 5см для пропускания люминесценции. Кювету освещают через одну из плоских стенок, а люминесценция наблюдается через отверстие на цилиндрической поверхности. Но такое сравнение редко приходится делать при измерении фосфоресценции или замедленной флуоресценции, поскольку интенсивность последней можно сравнить с обычной флуоресценцией того же раствора при идентичных условиях. Кювету с длинной трубкой, показанную на рис. 90, можно удобно разместить в сосуде Дьюара для измерений при высоких и низких температурах. [29]
В первом методе используются фотоумножитель и осциллограф, или быстродействующий гальванометр, или даже записывающее устройство с регистрацией на бумаге, если затухание проходит очень медленно. В случае более короткого времени жизни до области миллисекунд применяют фосфороскоп. Время жизни может быть вычислено при наблюдении изменения интенсивности в зависимости от скорости вращения, если известны угловое расстояние между прорезями и размеры прибора. Регистрирующий спектрофотометр Кэри использован Крейгом и Россом [67] для изучения ослабления триплет-триплетного поглощения у ряда ароматических углеводородов в твердых стеклах при температуре жидкого азота. Измеренное таким образом время жизни хорошо согласуется со значением, полученным при измерениях фосфоресценции. [30]
Страницы: 1 2 3