Аконитаз

Cтраница 4

При этом должна получаться смесь молекул цис-аконитовых кислот, меченных 14С по любой из двух крайних карбоксильных групп. Можно видеть, однако, что лимонная кислота является про-хиральной молекулой, которую для удобства можно изобразить следующим образом: С ( СН2СО2Н) 2 ( ОН) СО2Н, где хорошо видны все заместители у центрального атома углерода. При адсорбции молекул лимонной кислоты на ферменте ( аконитаза) происходит дифференциация между двумя химически эквивалентными группами СН2СО2Н, в результате чего дегидратация будет осуществляться исключительно в одном направлении. Следует отметить, что группы - СН2 также являются прохи-ральными центрами и образование цыс-аконитовой кислоты из лимонной под действием аконитазы будет осуществляться со специфическим отщеплением одного из двух водородных атомов соответствующей метиленовой группы. [46]

Физиологическое действие 2 2 - ДП исследовано также и на более простых организмах, где он оказывает аналогичное действие. Так, отмечено усиление накопления цитрата в культуре Aspergillus niger на среде с глюкозой в присутствии 2 2 - ДП. Реакция, которую подавляет 2 2 - ДП, не идентифицирована, но она связана с активностью аконитазы. [47]

Подчеркивалось, что в w - фторированных соединениях группа м-фтора служит уникальным индикатором метаболизма всей молекулы. У членов восходящего гомологического ряда ( о-фторированных соединений наблюдается удивительное изменение токсичности. Считается, что более токсичные члены, содержащие четное число атомов углерода, подвергаются р-окислению с образованием фторуксусной кислоты, тогда как менее токсичные члены образуют безобидную фторпропионовую кислоту. Петере [190] предположил, что накопление цитратов является следствием превращения фторацетата во фторцитрат, а это действие, конкурирующее с подавлением аконитазы, фермента, производящего превращение цитрата в цисаконитат и изоцитрат. [49]

Митцухаси и Дэвис [51] выделили 5-дегидрохиназу, которая катализирует реакцию 4 ( рис. 12) в горохе и шпинате. Балинский и Дэвис [53, 51] выделили в чистом виде редуктазу дегидрошикимовой кислоты ( реакция 5, рис, 12) из проростков гороха и изучили ее торможение фенольными соединениями. Найдено, что этот фермент связан с НАДФ и не воздействует на хинную и дегидрохинную кислоты. Удалось очистить также дегидрохиназу ( реакция 4, рис. 12) почек цветной капусты [54], и было показано, что она совершенно отличается отфумаразы или аконитазы. Найди и Гангли [55] выделили редуктазу дегидрошикимовой кислоты из проростков маш-фасоли ( Phaseolus aureus) и нашли, что она в присутствии НАДФ определяет равновесие, сдвинутое в сторону образования шикимовой кислоты. [50]

Подавление сукциноксидазы-цитохром-с-редуктазы из печени крысы 3-хлорэтилметансульфонатом. [51]

DL-малата, цитрата, пирувата, сукцината или глюкозы. Препарат подавляет растворимую сукциндегидразу, препараты сукциноксидазы-цитохром-с-ре - дуктазы и систему дисмутации пируватов, но не подавляет фумаразу, аконитазу и дегидразы L-яблочной, молочной или L-глутаминовой кислот. [52]

Она легко обнаруживается в корешках проростков кукурузы ( табл. 38); в более старых частях корней и в колеоптилях кукурузы, а также в молодых проростках пшеницы и ржи она, по-видимому, присутствует в наибольшем количестве по сравнению со всеми остальными кислотами. Распространенный в природе изомер этой кислоты имеет цис-кон-фигурацию, и аконитаза, по-видимому, специфична именно в отношении этой формы. Потребление z wc - аконитата in vitro тормозится транс-изомером, причем это торможение в значительной степени носит конкурентный характер. В экстрактах из растений эта кислота часто имеет ттгракс-конфигурацию, однако, поскольку известно, что в кислой среде цис-изомер быстро превращается в транс-форму, многие считают, что последняя, безусловно, является артефактом, возникающим в процессе экстракции. Тем не менее имеются достоверные данные, говорящие о том, что тракс-аконитаг встречается в природных условиях, а Мак-Лен - нан и Биверс [32] недавно показали, что около 95 % аконитата, накапливающегося в корнях кукурузы при подкормке ацетатом, имеет транс-конфигурацию. Извлеченная из корней аконитаза оказалась неактивной в отношении этой кислоты. Однако при введении в корни кукурузы С14 - ягракс-аконитата происходит включение метки в соединения цикла трикарбоновых кислот; это заставляет предполагать, что в корнях имеется какой-то механизм, осуществляющий превращение тракс-изомера в г ые-форму, которая способна использоваться в цикле трикарбоновых кислот. Однако вопрос о том, насколько-общей является эта способность, остается пока открытым. [53]

Схема предполагаемого распределения метки показана на фиг. Углекислый газ входит в состав р-карбоксильной группы яблочной кислоты. Однако следует ожидать, что в присутствии фумаразы яблочная кислота будет находиться в равновесии с фума-ровой кислотой, которая имеет симметричное строение молекулы. Таким образом, можно полагать, что метка будет присутствовать в карбоксильных группах как яблочной, так и щавелевоуксусной кислот. Хотя у лимонной кислоты мечены только две из трех карбоксильных групп, симметрия ее молекулы сохраняется за счет того, что метка включается в карбоксилы, расположенные около углеродов метиленовых групп. Необходимо рассмотреть и другой путь, при котором аконитаза может действовать на молекулу лимонной кислоты между центральным углеродным атомом и любым углеродом метиленовых групп. [54]

Настоящая глава посвящена рассмотрению еще одного аспекта гидролитических реакций, а именно реакций, включающих гидратацию двойных связей. Эта тема дает возможность логично перейти к обсуждению явления стереоспеиифичности, наблюдаемого в ферментативных процессах. Хорошо известно, что в сущности все ферменты обладают высокой степенью сте-рпческой избирательности по отношению к одному из двух сте-реоизомеров, если в реакции затрагивается непосредственно определенный асимметрический атом углерода. Стереоспецифнч-ность проявляется не только в реакциях гидратации и по отношению к асимметрическим соединениям, но, что более удивительно, распространяется на реакции с участием мезо-углерод-ных атомов Caabd, несущих две идентичные и две различающиеся группы. Это открытие, объясняющее экспериментальные аномалии, наблюдавшиеся при изучении ферментов, участвующих в цикле трпкарбоновых кислот ( 4 - 2), исторически связано с ферментативными реакциями гидратации. В интересах удобства изложения мы рассмотрим только два фермента этого никла - аконитазу и фумаразу. [55]

Страницы: 1 2 3 4