Cтраница 2
Добавление аминокислот после голодания вызывало инициацию репликации с лаг-периодом, равным всего 6 мин. [16]
Схема возможной организации репликативной вилки. [17] |
Нужны также белки, участвующие в инициации репликации, и топоизо. [18]
Схема возможной организации репликативной вилки. [19] |
Нужны также белки, участвующие в инициации репликации, и топоизомеразы. [20]
Инициация репликации дромосомы Е. coli. [21] |
Два фермента обеспечивают высокую избирательность инициации синтеза ДНК, ограничивая инициацию репликации только ориджином. Это топоизо-мераза I и РНКаза Н, избирательно гидролизующая РНК в составе гибридных дуплексов с ДНК - Действие этих ферментов направлено против гибридных ДНК-РНК-участков, которые могут случайно образоваться на ДНК при транскрипции и послужить затравками для начала синтеза ДНК. [22]
Инициация репликации хромосомы Е. coli. [23] |
Два фермента обеспечивают высокую избирательность инициации синтеза ДНК, ограничивая инициацию репликации только ориджином. Это топоизо-мераза I и РНКаза Н, избирательно гидролизующая РНК в составе гибридных дуплексов с ДНК - Действие этих ферментов направлено против гибридных ДНК-РНК-участков, которые могут случайно образоваться на ДНК при транскрипции и послужить затравками для начала синтеза ДНК. Возможная роль в этом процессе РНКазы Н очевидна: она способна непосредственно гидролизовать РНК во всех таких участках. Что касается роли топоизомеразы I, то необходимо отметить, что гибриды ДНК - РНК образуются лишь в том случае, если ДНК сверхспирализова-на ( образование гибридного дуплекса снимает часть избыточной энергии сверхспирализации), причем сверхспирализована достаточно сильно, чтобы локальные нарушения нормальной вторичной структуры ДНК могли способствовать гибридизации с РНК. [24]
Инициация репликации. хромосомы Е. coli. [25] |
Два фермента обеспечивают высокую избирательность инициации синтеза ДНК, ограничивая инициацию репликации только ориджином. [26]
Характерно, что длительность лаг-периода при выходе ПДН из малых тимоцитов примерно соответствует времени задержки инициации репликации после облучения, а размеры ПДН соответствуют фрагментам ДНК в пределах величины репликона. [27]
Если вектор представляет собой плазмиду, реплицирующуюся независимо от хромосомы, то он должен содержать сайт инициации репликации, функционирующий в хозяйской клетке. Поскольку технически многие операции с реком-бинантными ДНК сложнее проводить в клетках эукариот, чем прокариот, большинство эукариотических векторов сконструированы как челночные. Другими словами, эти векторы несут два типа сайтов инициации трансляции и два типа селективных маркерных генов, одни из которых функционируют в Escherichia coli, а другие - в эукариотических хозяйских клетках. Такие векторные системы экспрессии разработаны для дрожжей, насекомых и клеток млекопитающих. [29]
Искусственная хромосома содержит три основных элемента: концевые участки ( теломеры), центромеру и точки инициации репликации. Свойства теломерных областей хромосом человека хорошо изучены, чего нельзя сказать о центромерах и точках инициации репликации, и существовали опасения, что искусственную хромосому человека не удастся сконструировать, пока не будут досконально изучены все ее элементы. Y-хромосомы, высокомолекулярных фрагментов геномной ДНК и тело-мерных участков. В их центромерную область был встроен ген устойчивости к неомицину, что позволило использовать среду G418 в качестве селективной. [30]