Cтраница 2
Большинство ферментов максимально активны в зоне рН / близкой от нейтральной: липаза поджелудочной железы, трипсин, каталаза, фумараза и др. В сильно кислой среде при рН 1 5 - 2 0 отмечен оптимум рН пепсина, в щелочной при рН 9 8 - аргиназы. [16]
К истинным металлоферментам относятся: карбоксипептидаза A ( Zn) нитратредуктазы растений, грибов, бактерий ( Fe, Mo), аминоксидаза крови ( Си), L-глутаматдегидрогеназа ( Zn), кар-боангидраза животных и растений ( Zn) и др. К металлофермент-ным комплексам, влияние металла у которых не всегда связано с прямым взаимодействием его с активным центром, относят очень многие ферменты, в частности, многие пептидазы, некоторые дегидрогеназы, фосфатазы, аргиназу, енолазу и др. Следует подчеркнуть, что разделение на истинные металлоферменты и ме-таллоферментные комплексы является в значительной степени условным. [17]
Хантер и Петигрю возвращаются к первоначальному методу Янсена. Они прибавляют аргиназу и уреазу одновременно. [18]
Смешивают 1 мл раствора аргиназы с 3 мл воды, доводят рН до 6 8 и обрабатывают уреазой, как описано выше. [19]
Делают выводы о характере влияния рН на активность фермента. Отмечают оптимальное значение рН для аргиназы. [20]
Общее число собранных фракций равно десяти. Чтобы отыскать фракции, содержащие аргиназу, ставят качественную пробу на ее присутствие. [21]
Эти авторы используют двойную систему аргиназа - уреаза, в которой ионы аммония генерируются в простой двухступенчатой реакции. [22]
Опыт проводится в приборе Бан-Сл йка - Каллена для определения мочевины. В каждую пробирку добавляют 1 мл раствора аргиназы ( экстракт печени) и немного толуола. Пробирки помещают в термостат при 37 на 12 - 24 час. [23]
Однако не все ферм: енты подвергаются такому не компенсированному питанием распаду, как оксидазы аминокислот, гистидаза или ксантиндегид-рогеназа. Активность некоторых тканевых ферментов ( например, аргиназы) почти не изменяется при белковом голодании. Эта неравномерность в распаде белковой составной части ферментов и приводит к тому, что на первый план и в наиболее резкой форме выступают нарушения тех сторон обмена, которые оказываются наименее обеспеченными соответствующими ферментными системами. [24]
Процедура определения заключалась в следующем: 1 мл раствора аргиназы впрыскивали в буферный раствор ( 0 1 М трис-буфер, рН 7 5), содержащий аргинин, и следили за изменением во времени потенциала уреазного электрода, включенного против НКЭ. [25]
Так, Хори ( Hori) [589], изучая действие общего облучения на мышей в дозе 600р, обнаружил резкое понижение активности каталазы и окислительного фосфорилирования и повышение активности щелочной фосфатазы, сукциндегидрогеназы, холиноксидазы, цитохромоксидазы и дезоксирибонуклеазы. Однако не было обнаружено изменений в активности рибонуклеазы, аргиназы, эстеразы и тирозиназы. [26]
Для этого в каждой пробирке смешивают 0 2 мл препарата аргиназы, 1 6 мл глицинового буфера, 0 2 мл раствора аргинина. В четвертую ( контрольную) пробирку сначала добавляют 2 мл раствора ТХУ, а затем все перечисленные реактивы. [27]
Позднее некоторые исследователи показали, что при дефиците белка в питании в органах и тканях снижается активность большинства ферментов: аргиназы, трип-тофанпирролазы, уриказы, сукцинатдегидрогеназы, глу-таматдегидрогеназы, декарбоксилазы, сорбитолдегидро-геназы, псевдохолинэстеразы, аспартат - и аланин-ами-нотрансфераз, гистидазы и др.. В гомогенатах печени и почек крысят-отъемышей, получавших корм, бедный белком, Hutchinson и Labby ( 1964) обнаружили снижение активности карбамилфосфатсинтетазы, орнитин-транскарбамилазы, аргиназы, глутаматтрансферазы, глутамикощавелевоуксусной трансаминазы и L-глута-микодегидрогеназы при отсутствии изменений со стороны аргининсинтетазы. [28]
Однократная ингаляция 6300 мг / м3 при экспозиции 15 мин вызывала у кошек патологические изменения в печени, появление в ней жира, увеличение относительной массы органа. У мышей, крыс, морских свинок и кроликов при ингаляции снижение содержания белка и нарушение соотношений белковых фракций в крови, увеличение активности в сыворотке аминофераз, альдолазы, аргиназы, ксантиноксидазы, глутаминазы, как следствие нарушения клеточных мембран гепатоцитов. В митохондриях печени крыс усиливается перекисное окисление липидов ( Элерте и др.), меняется хемилюминесценция ткани печени. [29]
За единицу активности ( Е) фермента принимают такое его количество, которое катализирует превращение 1 мкмоль субстрата за 1 мин. Например, если при инкубации 0 5 мл экстракта печени с раствором аргинина за 15 мин разложилось 120 мкмолв аргинина, это означает, что в 0 5 мя экстракта содержится 120 / 158 Е аргиназы. [30]